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液相色譜儀特點及具體應用

更新時間:2017-12-04        閱讀:3102

 

液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。

 


液相色譜儀色譜特點:

高壓--壓力可達150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。

高速--流速為0.1~10.0 mL/min。

--塔板數可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。

高靈敏度--紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。

HPLC與經典液相色譜相比有以下優點:

速度快-通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內即可完成。

分辨率高--可選擇固定相和流動相以達到*分離效果。

靈敏度高--紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。

色譜柱可反復使用--用一根色譜柱可分離不同的化合物。

樣品量少,容易回收--樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。

 

 

液相色譜儀具體應用:

液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。

 

與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。

 

HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。

 

液相色譜- 質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜連用也發展很快,如在環境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境污染分析得到新的發展。

 

 

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