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制備液相色譜儀主要是由以下六部分組成的

更新時(shí)間:2020-06-21        閱讀:3205
  制備液相色譜儀是一種由儲(chǔ)液瓶、高壓泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、廢液瓶六部分組成的儀器。
  輸液泵是HPLC系統(tǒng)中zui重要的部件之一。泵的性能好壞直接影響到整個(gè)系統(tǒng)的質(zhì)量和分析結(jié)果的可靠性。輸液泵應(yīng)具備如下性能:
  1、流量穩(wěn)定,其RSD應(yīng)<0.5%,這對(duì)定性定量的正確性至關(guān)重要;
  2、流量范圍寬,分析型應(yīng)在0.1~10 ml/min范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào),制備型應(yīng)能達(dá)到100 ml/min;
  3、輸出壓力高,一般應(yīng)能達(dá)到150~300 kg/cm2;
  4、液缸容積小;
  5、密封性能好,耐腐蝕。
 

  泵的種類(lèi)很多,按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵。恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵。恒壓泵受柱阻影響,流量不穩(wěn)定;螺旋泵缸體太大,這兩種泵已被淘汰。目前應(yīng)用zui多的是柱塞往復(fù)泵。
  柱塞往復(fù)泵的液缸容積小,可至0.1ml,因此易于清洗和更換活動(dòng)相,特別適合于再循環(huán)和梯度洗脫;改變電機(jī)轉(zhuǎn)速能方便地調(diào)節(jié)流量,流量不受柱阻影響;泵壓可達(dá)400 kg/cm2。其主要缺點(diǎn)是輸出的脈沖性較大,現(xiàn)多采用雙泵系統(tǒng)來(lái)克服。雙泵按連接方式可分為并聯(lián)式和串聯(lián)式,一般說(shuō)來(lái)并聯(lián)泵的流量重現(xiàn)性較好,但出故障的機(jī)會(huì)較多,價(jià)格也較貴。
  早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器,裝在色譜柱進(jìn)口處。現(xiàn)在大都使用六通進(jìn)樣閥或自動(dòng)進(jìn)樣器。進(jìn)樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復(fù)性好,保證中心進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC進(jìn)樣方式可分為:隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣。
  1、隔膜進(jìn)樣:用微量注射器將樣品注進(jìn)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎即是零,可以獲得*的柱效,且價(jià)格便宜,操縱方便。但不能在高壓下使用(如10MPa以上);此外隔膜輕易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%;加之能耐各種溶劑的橡皮不易找到,常規(guī)分析使用受到限制。
  2、停流進(jìn)樣:可避免在高壓下進(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動(dòng)時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點(diǎn)是保存時(shí)間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號(hào)控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。
  3、閥進(jìn)樣:一般HPLC分析常用六通進(jìn)樣閥,其關(guān)鍵部件由圓形密封墊和固定底座組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在,柱效率低于隔膜進(jìn)樣,但耐高壓,進(jìn)樣量正確,重復(fù)性好(0.5%),操縱方便。
  4、自動(dòng)進(jìn)樣:用于大量樣品的常規(guī)分析。

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